Morphology and morphometry of feline bone marrow-derived mesenchymal stem cells in culture / Morfologia e morfometria das células-tronco mesenquimais isoladas de medula óssea de gato

Mesenchymal stem cells (MSC) are increasingly being proposed as a therapeutic option for treatment of a variety of different diseases in human and veterinary medicine. Stem cells have been isolated from feline bone marrow, however, very few data exist about the morphology of these cells and no data were found about the morphometry of feline bone marrow-derived MSCs (BM-MSCs). The objectives of this study were the isolation, growth evaluation, differentiation potential and characterization of feline BM-MSCs by their morphological and morphometric characteristics. in vitro differentiation assays were conducted to confirm the multipotency of feline MSC, as assessed by their ability to differentiate into three cell lineages (osteoblasts, chondrocytes, and adipocytes). To evaluate morphological and morphometric characteristics the cells are maintained in culture. Cells were observed with light microscope, with association of dyes, and they were measured at 24, 48, 72 and 120h of culture (P1 and P3). The non-parametric ANOVA test for independent samples was performed and the means were compared by Tukey's test. On average, the number of mononuclear cells obtained was 12.29 (±6.05x106) cells/mL of bone marrow. Morphologically, BM-MSCs were long and fusiforms, and squamous with abundant cytoplasm. In the morphometric study of the cells, it was observed a significant increase in average length of cells during the first passage. The cell lengths were 106.97±38.16µm and 177.91±71.61µm, respectively, at first and third passages (24 h). The cell widths were 30.79±16.75 µm and 40.18±20.46µm, respectively, at first and third passages (24 h).The nucleus length of the feline BM-MSCs at P1 increased from 16.28µm (24h) to 21.29µm (120h). However, at P3, the nucleus length was 26.35µm (24h) and 25.22µm (120h). This information could be important for future application and use of feline BM-MSCs.(AU)

As células tronco mesenquimais são utilizadas na terapia de várias doenças na medicina humana e veterinária. As células tronco foram isoladas da medula óssea de gato, entretanto, existem poucos dados referentes a morfologia e não existem informações sobre a morfometria das células tronco isoladas da medula óssea. Os objetivos do presente estudo foram o isolamento, avaliação do crescimento, potencial de diferenciação e caracterização morfológica e morfométrica das células mesenquimais de gato isoladas de medula óssea. A diferenciação in vitro foi realizada para confirmar a multipotencialidade das células mesenquimais de gato (diferenciação em osteoblastos, condrócitos, adipócitos). As células mesenquimais foram mantidas em cultivo para avaliações morfológica e morfométrica. As células foram coradas e observadas em microscopia ótica. As mensurações foram realizadas com 24, 48, 72 e 120h de cultura (primeira e terceira passagens). O teste não paramétrico ANOVA foi utilizado e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey. O número médio de células mononucleares obtido foi de 12,29 (±6,05x106) células/mL de medula óssea. As células mesenquimais são longas e fusiformes, e escamosas com citoplasma abundante. No estudo morfométrico, observou-se aumento no comprimento médio das células durante a primeira passagem. As medidas de comprimento das células foram: 106,97±38,16µm e 177,91±71,61µm, respectivamente, na primeira e terceira passagens (24 horas). As medidas de largura das células foram: 30,79±16,75 µm e 40,18±20,46 µm, respectivamente, na primeira e terceira passagens (24 horas). O comprimento do núcleo na primeira passagem aumentou de 16,28µm (24h) para 21,29µm (120h) e na terceira passagem foi de 26,35µm (24h) para 25,22µm (120h). As informações são importantes para futuras aplicações e uso da célula mesenquimal de gato.(AU)

Frequency of antibodies against Neospora caninum in stray and domiciled dogs from urban, periurban and rural areas from Paraná State, Southern Brazil / Frequência de anticorpos contra Neospora caninum em cães errantes e domiciliados das áreas urbana, periurbana e rurais do Estado do Paraná, sul do Brasil

Antibodies to Neospora caninum were analyzed by an indirect fluorescent antibody test (IFAT), in stray and domiciled dogs from urban, periurban and rural areas from Curitiba, Paraná State, Brazil. Of the total of 556 dogs, 18.17 percent (101) were positive for N. caninum (titer 50). Frequency of antibody was 12.71 in urban, 15.73 in periurban, and 25.38 percent in rural dogs. Rural dogs had a significantly higher frequency of antibodies than urban dogs (P< 0.05). There were no significant differences between the frequencies of antibodies in urban and periurban dogs (P>0.05), and between dogs from periurban and rural areas (P>0.05). Antibodies to N. caninum were detected in 34 of 233 domiciled dogs (14.59 percent) and in 17 of 126 stray dogs (13.49 percent). No statistical differences were observed considering life-style and geographic location of origin (P>0.05). Neospora caninum is widespread among dogs from urban, periurban and rural areas of the municipal district of Curitiba, Paraná, Brazil.

Anticorpos anti-Neospora caninum foram detectados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), em cães errantes e domiciliados das áreas urbana, periurbana e rurais de Curitiba, estado do Paraná, Brasil. Do total de 556 cães, 18,17 por cento (101) foram soropositivos para N. caninum (título de 1:50). A frequência de anticorpos foi de 12,71 por cento nos cães urbanos, de 15,73 por cento nos periurbanos e de 25,38 por cento nos cães rurais. Nos cães rurais a frequência de anticorpos foi maior do que nos cães urbanos (P<0.05). Não houve diferença significativa entre as frequências de anticorpos dos cães urbanos e periurbanos (P>0,05), e dos periurbanos e rurais (P>0,05). Os anticorpos anti N. caninum foram detectados em 34 de 233 cães domiciliados (14,59 por cento) e em 17 de 126 cães errantes (13,49 por cento). Não houve diferença estatística significativa entre o tipo de criação e a origem (P>0,05). Neospora caninum está presente nos cães urbanos e periurbanos de Curitiba e nas áreas rurais do Estado do Paraná.